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上海通蔚生物科技有限公司PCR試劑盒基本反應步驟及其注意事項說明
日期：2025-06-20 17:43
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摘要：上海通蔚實業有限公司位于直轄市之一的上海，且依托上海張江高科生物研究優勢，已發展成集科研、生產、銷售為一體性科研企業。我們有好的產品和專業的團隊。公司發展迅速，我們為客戶提供科研產品、良好的技術支持、健全的售后服務。
一、PCR技術的基本原理：
類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。
二、PCR試劑盒由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：
1、模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備?！?o:p>
2、模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合?！?o:p>
3、引物的延伸：DNA模板--引物結合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。
三、注意事項：
由于PCR反應非常靈敏可以擴增目的基因序列超過1000萬倍，在使用Taq酶時請注意避免微量待擴增DNA的污染，并盡量考慮設置不加模板的空白對照以確認是否有待擴增DNA的污染。
上海通蔚實業有限公司位于直轄市之一的上海，且依托上海張江高科生物研究優勢，已發展成集科研、生產、銷售為一體性科研企業。我們有好的產品和專業的團隊。公司發展迅速，我們為客戶提供科研產品、良好的技術支持、健全的售后服務。