羥甲基戊二酰輔酶A合成酶(HMGCS)測試盒
測定方法:   微量法
測定規格:   100管/96樣
保存條件:   低溫避光保存
有 效 期:    6個月
注   意 :     正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

 測定意義:

羥甲基戊二酰輔酶A合成酶是甲羥戊酸代謝途徑中的關鍵酶,催化乙酰CoA與乙酰乙酰CoA生成羥甲基戊二酰CoA。

 測定原理:

HMGCS催化乙酰CoA與乙酰乙酰CoA生成羥甲基戊二酰CoA,同時產生CoASH,使DTNB轉化為黃色的TNB,在412nm下有特征吸光值。

 所需的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

 樣本測定的準備:

1、細胞或組織樣品的制備:
或培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。